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第一章 课前教育 1

第一节 概述 1

一、开设生物化学实验的目的 1

二、怎样做好生物化学实验 1

三、生物化学实验技术发展简史 2

第二节 生物化学实验室一般知识 3

一、实验室安全知识 3

二、实验室急救知识 4

三、实验记录 7

四、实验报告 8

第二章 验证性实验 10

实验一 总糖和还原糖的测定 10

Ⅰ Fehling试剂热滴定法 10

Ⅱ苯酚-硫酸法 14

知识链接：可见光分光光度计 16

实验二 血糖含量的测定 18

Ⅰ邻甲苯胺法 18

Ⅱ葡萄糖氧化酶法 20

知识链接：电热恒温水浴箱 23

实验三 血清总胆固醇的测定 24

Ⅰ磷硫铁显色法 24

Ⅱ酶法 26

知识链接：移液枪 28

实验四 蛋白质等电点的测定 31

知识链接：搅拌与振荡 33

实验五 蛋白质的定量测定 35

Ⅰ双缩脲法 35

Ⅱ Folin-酚法 37

Ⅲ考马斯亮蓝染色法 39

知识链接：紫外-可见分光光度计 42

实验六 核酸含量的测定 44

Ⅰ定糖法 44

Ⅱ定磷法 47

Ⅲ紫外分光光度法 50

知识链接：生物样品的消化处理 52

实验七 酶促反应动力学 53

Ⅰ影响酶促反应速度的因素——温度、pH和抑制剂 53

Ⅱ底物浓度对酶促反应速度的影响 56

知识链接：缓冲溶液的选择 59

实验八 淀粉酶活力的测定 60

知识链接：玻璃和塑料仪器的清洗与干燥 62

实验九 糖酵解中间产物的鉴定 64

知识链接：吸管的使用 66

实验十 脂肪酸的β-氧化 69

知识链接：电动离心机 71

实验十一 氨基转换反应 73

Ⅰ分光光度法测定血液中转氨酶活力 73

Ⅱ纸层析法鉴定谷丙转氨酶 76

知识链接：转氨酶 79

第三章 技术性实验 81

实验十二 氨基酸的分离 81

Ⅰ纸层析法 81

Ⅱ离子交换柱层析法 84

知识链接：离子交换柱层析技术 88

实验十三 蛋白质分子量的测定 92

Ⅰ SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 92

Ⅱ葡萄糖凝胶过滤法 98

知识链接：常用凝胶的分类与选择 103

实验十四 蛋白质的分离 105

Ⅰ血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 105

Ⅱ血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 107

知识链接：电泳技术 110

第四章 综合性实验 113

实验十五 天然产物中多糖的提取、纯化与鉴定 113

知识链接 薄层层析技术 119

实验十六 不同水果中维生素C含量测定及比较 121

实验十七 血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定 124

知识链接 自动分部收集器 128

实验十八 酵母RNA的提取及组分鉴定 130

附录 133

Ⅰ凝胶染料的种类及特点 133

Ⅱ层析法常用数据表 134

参考文献 142