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第一章 概论 1

第一节 植物细胞悬浮培养技术对药用植物产业开发的意义 1

第二节 植物细胞及其生长特点 3

一、植物细胞的结构与功能 3

二、植物细胞生长特点 5

第三节 植物细胞悬浮培养的应用与发展趋势 11

一、植物细胞悬浮培养技术的优点 11

二、植物细胞悬浮培养在中药现代化中的应用 11

三、植物细胞悬浮培养的发展趋势 12

参考文献 13

第二章 药用植物组织培养的基本方法 14

第一节 植物组织培养的基本设备 14

一、无菌室与超净工作台 14

二、培养室 16

三、玻璃器皿 16

四、化学试剂 17

第二节 植物组织培养的基本技术与方法 18

一、培养基 18

二、外植体 28

三、愈伤组织的诱导与继代培养 31

参考文献 37

第三章 药用植物细胞的大规模悬浮培养 38

第一节 细胞株的获取与扩大培养 38

一、单细胞的获得 38

二、单细胞扩大培养 40

三、影响单细胞生长的因素 42

第二节 植物细胞的悬浮培养 42

一、植物细胞悬浮培养方法 43

二、植物细胞悬浮培养设备 46

三、影响细胞悬浮培养的因素 57

第三节 高产植物细胞株的选育 60

一、筛选高产细胞系 61

二、诱变育种 64

参考文献 66

第四章 提高药用植物悬浮细胞活性成分的方法 68

第一节 培养条件的优化 68

一、优化培养基的组成 68

二、优化培养环境条件 70

第二节 诱导子的使用 70

一、诱导子诱导的植物细胞防御反应中的常见生理反应 72

二、常用的一些诱导子 75

第三节 代谢抑制剂的添加与前体物饲喂 77

一、添加抑制剂 77

二、前体饲喂 77

第四节 培养方式与新型生物反应器 78

一、培养方式 78

二、新型生物反应器的使用 80

参考文献 80

第五章 一些药用植物细胞的悬浮培养方法 82

第一节 红豆杉细胞悬浮培养生产紫杉醇 82

一、紫杉醇的化学结构与理化性质 82

二、紫杉醇的作用 82

三、紫杉醇的生产方法 83

四、红豆杉细胞悬浮培养生产紫杉醇工艺 86

第二节 人参细胞悬浮培养生产人参皂苷 92

一、人参皂苷与其生理活性 92

二、人参细胞的悬浮培养 95

三、西洋参毛状根和冠瘿瘤的培养 98

四、产物提取与分析 98

第三节 海南粗榧细胞悬浮培养生产抗癌生物碱 99

一、海南粗榧简介 99

二、海南粗榧碱与其功能 99

三、粗榧碱的生物合成途径 100

四、海南粗榧细胞悬浮培养生产抗癌生物碱 101

第四节 紫草细胞悬浮培养生产紫草素 108

一、紫草素及其生理活性 108

二、紫草素及其衍生物的生物合成途径 109

三、紫草细胞悬浮培养合成紫草素及其衍生物 110

参考文献 113

第六章 植物细胞悬浮培养的研究方法 116

第一节 植物悬浮细胞常用生理指标分析方法 116

一、细胞生物量的测定 116

二、细胞活力测定 116

三、细胞死亡率测定 117

四、底物消耗测定 117

五、细胞褐变与酚积累测定 119

第二节 植物细胞防御反应的研究方法 120

一、pH 121

二、活性氧迸发研究 121

三、苯丙氨酸解氨酶 125

四、酚 126

五、糖代谢途径一些关键酶的测定 127

第三节 内生真菌与植物悬浮细胞的耦合培养 128

一、耦合培养设备 129

二、耦合培养方法 130

三、影响耦合培养的因素研究 131

参考文献 134

第七章 产物提取与分析 136

第一节 样品前处理 137

一、液-液萃取 138

二、固相萃取 138

三、固相微萃取 139

四、液相微萃取 140

五、色谱衍生化技术 142

六、膜分离技术 143

七、超临界流体萃取 143

八、微波辅助萃取 144

九、超声辅助萃取 145

十、浊点萃取 145

第二节 薄层色谱扫描法 146

一、薄层色谱的固定相 147

二、展开剂的选择 151

三、薄层色谱扫描法及仪器 153

四、薄层色谱扫描法的定量方法 155

五、分析实例 156

第三节 气相色谱与气-质联用技术 159

一、气路系统 159

二、进样系统 160

三、分离系统 161

四、检测系统 162

五、气-质联用技术 164

六、分析实例 172

第四节 高效液相色谱法和液-质联用技术 176

一、HPLC的关键部分——色谱柱 176

二、检测器 180

三、流动相 185

四、液-质联用 187

五、分析实例 190

第五节 毛细管电泳仪 194

一、毛细管电泳仪基本结构 194

二、毛细管电泳的基本分离原理 195

三、常用分离模式 195

四、毛细管柱 201

五、检测方法和检测器 202

六、分析实例 203

第六节 离子色谱 211

一、离子色谱的基本原理 212

二、离子色谱系统组成 215

三、离子色谱的分离系统 216

四、离子色谱的抑制系统 216

五、离子色谱的衍生系统 218

六、离子色谱的检测系统 218

七、应用实例 219

参考文献 226