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第一部分 生物化学实验基本要求与常用仪器使用方法 1

第一章 生物化学实验基本操作 1

第二章 生物活性成分的制备 5

第三章 分光光度技术 13

第四章 荧光光谱技术 17

第五章 层析技术 21

第六章 电泳技术 34

第七章 离心技术 53

第二部分 实验 58

第八章 糖 58

实验一 总糖和还原糖的测定（3，5-二硝基水杨酸法） 58

实验二 蒽酮比色定糖法 60

实验三 血液中葡萄糖含量的测定（Folin-Wu法） 61

第九章 蛋白质 64

实验四 蛋白质含量的测定 64

Ⅰ.凯氏定氮法测定蛋白质含量 64

Ⅱ.紫外吸收法测定蛋白质含量 68

Ⅲ.双缩脲（Biuret）法测定蛋白质含量 69

Ⅳ.Folin-酚法测定蛋白质含量 71

Ⅴ.考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量 73

实验五 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质 74

实验六 不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳分离预染的血清脂蛋白 77

实验七 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量 80

实验八 凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量 84

实验九 植物组织中游离氨基酸的分离鉴定 88

实验十 蛋白质两性解离及等电点的测定 89

第十章 酶 92

实验十一 影响酶作用的因素 92

实验十二 过氧化氢酶活力的测定 95

实验十三 淀粉酶活力的测定 96

实验十四 植酸酶活性的测定 99

实验十五 蛋白酶活性的测定 101

实验十六 血清碱性磷酸酶活性的测定 104

实验十七 荞麦胰蛋白酶抑制剂活性测定 106

实验十八 离子交换层析法纯化荞麦胰蛋白酶抑制剂 108

实验十九 亲和层析法纯化荞麦胰蛋白酶抑制剂 111

实验二十 β-葡萄糖苷酶活性的测定（pNPG法） 113

实验二十一 苦荞重组PAL的活性鉴定 115

第十一章 维生素 117

实验二十二 维生素C的定量测定 117

实验二十三 维生素B1的定量测定 119

第十二章 核酸 122

实验二十四 植物组织中DNA的提取和纯度鉴定 122

实验二十五 肝脏DNA的提取及纯度鉴定 123

实验二十六 质粒DNA的小量提取（碱裂解法） 126

实验二十七 纳米磁性粒子法小量提取细菌质粒DNA 130

实验二十八 植物叶片总RNA小量制备（Trizol法） 132

实验二十九 紫外吸收法测定核酸含量 134

实验三十 二苯胺法测定DNA含量 135

实验三十一 定磷法测定RNA含量 137

实验三十二 琼脂糖凝胶电泳分离鉴定DNA 139

第十三章 体内代谢 142

实验三十三 酶促转氨基作用及其鉴定 142

实验三十四 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 144

实验三十五 血清谷丙转氨酶（SGPT）活力测定 146

实验三十六 植物总黄酮的提取与测定 148

第十四章 生物化学综合实验 151

实验三十七 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白印迹 151

实验三十八 猪血超氧化物歧化酶的分离纯化、活性测定及同工酶鉴定 154

实验三十九 目的基因的PCR扩增 158

附录 161

附录A常用缓冲溶液的配制方法 161

附录B硫酸铵饱和度的常用表 167

附录C常用指示剂的配制 169

参考文献 170