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第一部分 理论和技术原理 2

第一章 基因和基因技术基础 2

第一节 基因和基因技术的发展 2

第二节 基因和基因组基础 10

第三节 生物信息学工具 37

第四节 基因操作中的模式生物 47

复习题 50

第二章 基本技术和工具 51

第一节 DNA/RNA的提取 52

第二节 电泳技术 61

第三节 特异的检测技术 67

第四节 工具酶 82

第五节 遗传转化 88

复习题 89

第三章 离体基因扩增 91

第一节 聚合酶链式反应 91

第二节 PCR反应的组成和设计 93

第三节 PCR反应循环及参数 98

第四节 PCR中的几个问题 99

第五节 各种PCR扩增及其应用 102

第六节 其他核酸扩增技术 117

复习题 123

第四章 重组技术 124

第一节 特异的DNA内切酶及其特点 125

第二节 连接和重组 134

第三节 同源重组技术 145

复习题 151

第五章 质粒载体 153

第一节 质粒生物学和质粒载体 153

第二节 质粒载体的功能元件 158

第三节 表达载体 165

复习题 174

第六章 噬菌体衍生的载体 175

第一节 λ噬菌体 175

第二节 λ噬菌体载体 178

第三节 λ噬菌体衍生的质粒载体——柯斯质粒 181

第四节 单链DNA载体 183

第五节 P1噬菌体衍生的载体 186

复习题 189

第七章 基因克隆 190

第一节 基因组DNA文库 191

第二节 cDNA文库 195

第三节 克隆筛选的策略 201

复习题 215

第八章 DNA测序 216

第一节 双脱氧终止法DNA测序 218

第二节 DNA测序的自动化 221

第三节 基因组测序 223

第四节 新一代测序技术 228

第五节 测序在研究中的应用 233

复习题 235

第九章 离体突变和基因创建 236

第一节 DNA和基因的化学合成 236

第二节 离体突变 237

第三节 分子进化 252

复习题 259

第十章 蛋白质组学技术原理 260

第一节 蛋白质样本制备 260

第二节 复杂样本的蛋白质分离 263

第三节 蛋白质酶解及肽段分离 266

第四节 肽混合物质谱分析 269

第五节 定量蛋白质组学研究技术 274

第六节 蛋白质组学数据分析技术 280

复习题 290

第十一章 酵母和动物基因操作 291

第一节 酿酒酵母基因操作 292

第二节 毕赤酵母和昆虫细胞表达系统 297

第三节 动物细胞培养和转染 300

第四节 转基因动物 313

第五节 动物基因改造的应用 316

复习题 319

第十二章 植物转基因 321

第一节 转基因载体和外源基因导入技术 322

第二节 植物转基因的选择和筛选标记 332

第三节 转基因结构和表达 335

第四节 基因开发和转基因植物 342

复习题 348

第二部分 实验操作 352

第一单元 基本技术 352

实验一 生物信息学实验：基因检索和表达克隆设计 352

实验二 实验室基本操作 355

实验三 大肠杆菌的培养和分离 360

实验四 蛋白质SDS-PAGE电泳 362

实验五 质粒DNA的分离 366

实验六 基因组DNA提取 367

实验七 总RNA的提取 371

实验八 聚合酶链式反应（PCR）扩增和电泳观察 372

实验九 质粒DNA酶切及凝胶电泳 374

实验十 DNA片段的分离纯化 376

实验十一 DNA末端的连接 377

实验十二 感受态细胞的制备 378

实验十三 大肠杆菌的遗传转化 379

实验十四 蛋白质二维电泳分离及胶内蛋白质点质谱分析 380

实验十五 SSR分子标记 385

第二单元 综合实验 389

综合实验一 EGFP蛋白质的克隆表达 389

综合实验二 植物转基因 394

综合实验三 动物细胞基因操作 398

附录 403

一、常用生物信息学网址 404

二、常用核酸、蛋白质数据 406

三、度量衡 407

四、基因的命名 408

五、糖类的结构 409

六、MS培养基 410

参考文献 411

索引 413