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第一章 琼脂糖凝胶电泳 1

一、实验材料 2

二、实验仪器 2

三、操作步骤 2

四、技术要点 2

第二章 基因组DNA的提取 4

一、从植物组织提取基因组DNA 4

二、从动物组织提取基因组DNA 5

三、细菌基因组DNA的制备 6

四、丝状真菌基因组DNA的制备 7

五、酵母基因组DNA的制备 7

六、基因组DNA的检测 8

第三章RNA的提取和cDNA的合成 9

一、动植物组织mRNA提取 11

二、植物病毒RNA提取 13

三、丝状真菌RNA提取 14

四、细菌RNA提取 16

五、酵母RNA提取 17

六、cDNA的合成 18

第四章 聚合酶链反应（PCR） 21

一、常规PC R技术 21

二、降落PCR 25

三、RACE技术 25

四、实时荧光定量PCR 27

第五章DNA酶切 31

一、实验材料 32

二、实验仪器 32

三、操作步骤 32

四、技术要点 33

第六章 重组质粒的连接 37

一、实验材料 38

二、实验仪器 38

三、操作步骤 38

四、技术要点 38

第七章 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 39

一、CaCl2法制备感受态细胞及转化 40

二、大肠杆菌超级感受态细胞的制备 41

三、电转化感受态细胞的制备及转化 42

第八章 质粒DNA的提取 45

一、实验材料 46

二、操作步骤 46

三、技术要点 47

第九章 聚丙烯酰胺凝胶电泳 48

一、实验材料 49

二、实验仪器 49

三、操作步骤 49

四、技术要点 50

第十章 融合蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 53

一、实验材料 54

二、实验仪器 54

三、操作步骤 54

四、技术要点 55

第十一章 分子杂交技术 56

一、核酸探针标记的方法 56

二、Southern杂交 63

三、Northern杂交 65

四、Western杂交 67

五、菌落原位杂交 68

六、斑点杂交 70

七、杂交反应的条件及参数的优化 71

第十二章RFLP和RAPD技术 73

一、RFLP技术 74

二、RAPD技术 75

第十三章EMSA实验方案 77

一、实验试剂 78

二、操作步骤 80

第十四章 酵母双杂合系统筛选相互作用的蛋白 85

一、实验材料与方法 86

二、阳性克隆的进一步证实 94

三、注意事项 94

附录一 质粒图谱 96

附录二 常用微生物培养基配方 101

参考文献 102