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MITA介导的细胞抗病毒反应信号转导及其调节机制
  • 钟波,舒红兵著 著
  • 出版社: 武汉:武汉大学出版社
  • ISBN:9787307117136
  • 出版时间:2013
  • 标注页数:163页
  • 文件大小:42MB
  • 文件页数:178页
  • 主题词:病毒病-细胞免疫学-研究

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图书目录

第一章 研究背景 1

第一节 抗病毒天然免疫概述 1

一、天然免疫简介 1

二、抗病毒天然免疫反应信号转导概述 3

三、Ⅰ型干扰素转录激活机制 5

第二节 PRRs及其介导的天然抗病毒免疫反应信号转导 11

一、识别病毒的模式识别受体及其对病毒的识别 11

二、PRRs协同作用介导细胞抗病毒反应 31

三、PRRs介导的细胞抗病毒反应信号转导 34

第三节 PRRs介导的信号转导的调节机制 45

一、阻断介导信号转导的分子间的相互作用 49

二、降解介导信号转导的蛋白 50

三、调节信号分子的去泛素化 51

四、其他 52

第二章 实验材料与实验方法 54

第一节 实验材料 54

一、荧光素酶报告基因实验相关材料 54

二、细胞、细胞因子与细胞培养 54

三、载体构建所需材料 55

四、酵母双杂交所需材料 55

五、免疫共沉淀以及Western blot实验相关材料 55

第二节 实验方法 56

一、质粒构建、DNA纯化、磷酸钙沉淀转梁293细胞、免疫共沉淀、Western blot与RNA blot 56

二、荧光素酶报告基因实验 57

三、表达克隆筛选 57

四、酵母双杂交实验 57

五、亚细胞器分离实验 60

六、RT-PCR实验 60

七、VSV空斑实验 61

八、泛素化实验 61

九、LC-MS/MS鉴定MITA磷酸化位点 62

十、免疫荧光与激光共聚焦显微镜观察 62

十一、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 62

十二、原代细胞的培养与转染 63

十三、32P in vivo标记细胞与放射自显影实验 64

十四、体外泛素化实验 64

第三章 实验结果与讨论 65

第一节 MITA介导的信号转导机制 65

一、研究背景与立项依据概述 65

二、MITA的鉴定与表达分析 66

三、过表达MITA能有效激活IRF3 66

四、RNAi下调MITA的表达抑制SeV诱导的IFN-β的表达 68

五、MITA定位于线粒体 72

六、MITA与VISA、RIG-I相互作用 78

七、MITA作为支架蛋白促进TBK1-IRF3的相互作用 82

八、TBK1介导MITA的磷酸化促进MITA对IRF3的激活 86

九、小结与讨论 88

第二节 RNF5对MITA介导信号转导的调节 92

一、研究背景和立项依据概述 92

二、RNF5是MITA相互作用蛋白 92

三、过表达RNF5抑制病毒感染引起的IFN-β的激活 95

四、RNAi下调RNF5的表达促进病毒感染引起的IFN-β的激活 99

五、RNF5在MITA水平调节细胞抗病毒反应 101

六、RNF5催化MITA泛素化降解 104

七、RNF5催化MITA泛素化发生在MITA K150 108

八、RNF5在线粒体泛素化MITA 109

九、小结与讨论 111

第三节 RNF5催化VISA泛素化降解 112

一、研究背景与立项依据概述 112

二、病毒感染诱导RNF5与VISA相互作用 113

三、RNF5诱导VISA通过泛素-蛋白酶体途径降解 113

四、RNF5泛素化VISA发生在K361和K462 118

五、RNF5对VISA的泛素化独立于Itch 119

六、小结与讨论 121

第四节 研究总结与展望 123

参考文献 125

缩略词表 156

致谢 161

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