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第一篇 生物化学与分子生物学实验基础 3

第一章 实验室基本知识 3

第一节 实验须知 3

第二节 生物化学基本操作训练 3

第三节 学生实验常用仪器 7

第四节 实验室安全知识 12

第二章 常用生物化学与分子生物学技术原理 15

第一节 分光光度法 15

第二节 层析技术 19

第三节 电泳技术 31

第四节 离心技术 51

第五节 分子生物学基本原理 58

第二篇 生物化学与分子生物学实验 89

第三章 基础性实验 89

实验一 蛋白质的两性反应及等电点测定 89

实验二 血红蛋白及其衍生物的吸收光谱测定 91

实验三 蛋白质的定量测定——双缩脲试剂法（Biuret法） 92

实验四 蛋白质的定量测定——福林-酚试剂法（Lowry法） 95

实验五 蛋白质的定量测定——Bradford法 96

实验六 蛋白质的定量测定——紫外分光光度法 98

实验七 用离子交换层析法分离混合氨基酸 99

实验八 凝胶过滤分离高铁血红蛋白与高铁氰化钾 102

实验九 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白 104

实验十 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质 106

实验十一 核酸的定量测定 110

实验十二 外周血白细胞DNA提取——微量法 113

实验十三 从琼脂糖凝胶中回收DNA片段——低熔点胶法 114

实验十四 质粒DNA的提取与纯化——碱裂解法 117

实验十五 质粒DNA的提取与纯化——柱层析法 119

实验十六 聚合酶链反应 121

实验十七 大肠埃希菌质粒转化试验 123

实验十八 质粒DNA的限制性内切核酸酶酶切鉴定 125

实验十九 单链构象多态性分析 126

实验二十 蔗糖酶与淀粉酶的专一性 129

实验二十一 底物浓度及抑制剂对酶促反应速率的影响 131

实验二十二 温度、pH对酶促反应速率的影响 133

实验二十三 比色法血清乳酸脱氢酶活性测定 135

实验二十四 乳酸脱氢酶同工酶活性测定 138

实验二十五 糖原合酶活性测定 140

实验二十六 酶法（GOD-POD法）测血糖 141

实验二十七 肝糖原的提取与测定 143

实验二十八 血清总胆固醇测定——三联酶法 145

实验二十九 脂肪皂化值和碘值的测定 146

实验三十 肝组织的生酮作用 149

实验三十一 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 151

实验三十二 转氨基作用及其鉴定 153

实验三十三 血氨测定 155

实验三十四 血清尿素氮测定（二乙酰-肟法） 157

实验三十五 血清尿酸测定 159

第四章 综合性实验 161

实验三十六 微量凯氏定氮法测定血清总蛋白 161

实验三十七 血清γ球蛋白的分离与纯化 164

实验三十八 酵母RNA的提取（浓盐法）及成分鉴定 167

实验三十九 凝胶过滤分离纯化脲酶及其活性测定 170

实验四十 胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 174

实验四十一 红细胞膜的制备与膜蛋白及总胆固醇含量测定 176

实验四十二 血清IgG的Western印迹分析 180

第五章 设计性实验 184

实验四十三 蛋白质的沉淀反应 184

实验四十四 血清胆红素测定 185

第六章 创新性实验 187

实验四十五 食品中常见有害添加物质的简单检测 187

实验四十六 真核生物基因的克隆与表达 188

主要参考文献 191

附录 生物化学与分子生物学实验常用数据 192

一、清洗液的配制 192

二、化学元素原子序数和相对原子质量表 193

三、常用计量单位换算表 194

四、常用缓冲液的配制 195

五、常见限制性内切核酸酶 201