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第一章 基因与基因组 1

第一节 核酸的结构与功能 1

第二节 染色体的结构 8

第三节 遗传信息的传递 11

第四节 基因及其结构 31

第五节 基因组 34

第六节 基因的表达与调控 37

第二章 核酸提取技术 44

第一节 基本原理 44

第二节 DNA的提取 46

第三节 RNA的提取 51

第四节 核酸的定量与保存 55

第三章 基因扩增技术 59

第一节 基本原理 59

第二节 引物设计 59

第三节 反应体系 71

第四节 常用PCR技术 75

第五节 PCR技术应用 86

第四章 电泳技术 88

第一节 基本原理 88

第二节 琼脂糖凝胶电泳 91

第三节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 96

第四节 其他电泳技术 98

第五章 常用工具酶与基因工程载体 110

第一节 常用工具酶 110

第二节 常用基因工程载体 120

第六章 外源基因的克隆与表达 144

第一节 DNA片段的体外连接 144

第二节 重组子导入宿主细胞 152

第三节 重组克隆的筛选与鉴定 154

第四节 外源基因的蛋白质表达 159

第五节 外源基因表达产物的检测 166

第七章 DNA测序技术 169

第一节 Sanger双脱氧链终止法测序 169

第二节 Maxam-Gilbert化学降解法 173

第三节 DNA序列测定的策略 176

第八章 生物信息学 178

第一节 概述 178

第二节 生物信息学的研究方法与内容 179

第三节 生物信息数据库与查询 184

第四节 序列比对和数据库搜索 195

第九章 基因操作技术应用 204

案例一 猪α干扰素基因克隆、原核表达及抗病毒活性研究 204

案例二 淮南猪IL-2基因在昆虫细胞中的表达及生物学活性测定 209

案例三 H5N1亚型AIV河南株HA基因在重组禽痘病毒的表达 215

第十章 实验部分 223

实验一 动物基因组DNA的提取 223

实验二 PCR扩增目的基因 224

实验三 琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 226

实验四 扩增目的基因片段的回收、酶切与连接 227

实验五 大肠杆菌感受态细胞的制备 230

实验六 转化 232

实验七 质粒DNA的提取与定量 233

实验八 转化克隆的筛选和鉴定 235

实验九 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 238

实验十 SDS-PAGE电泳检测表达蛋白 239

附录一 基因操作技术实验室操作规范及注意事项 242

附录二 细菌培养基的配制 244

附录三 常用溶液与配制 246

附录四 常用实验设备的使用规则、方法 257

参考文献 269