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第一章 核酸的分离纯化与鉴定 1

一、概述 1

二、核酸分离制备的总原则 1

三、核酸提纯的主要步骤 2

四、核酸制备的影响因素 2

五、真核基因组DNA的分离纯化与测定 3

六、原核生物基因组DNA的分离纯化与鉴定 3

七、真核生物RNA的分离纯化与鉴定 6

实验一 蛋白酶K-酚抽提法 7

实验二 人血白细胞DNA的提取（NaI法） 11

实验三 小样本中基因组DNA的分离 18

实验四 碱裂解法提取质粒DNA的分离 20

实验五 聚乙二醇-氯化镁沉淀法纯化质粒DNA 23

实验六 异硫氰酸胍-酚-三氯甲烷一步法制备组织和细胞中的总RNA 25

实验七 氯化锂-尿素法制备总RNA 28

实验八 Trizol专用试剂分离RNA 29

实验九 磁珠分离mRNA 31

第二章 聚合酶链反应 34

一、PCR原理 34

二、PCR反应体系 35

实验十 大肠杆菌的PCR检测 36

实验十一 流感病毒的RT-PCR检测 38

实验十二 乙型肝炎病毒（HBV） 41

第三章 分子克隆 45

实验十三 DNA的限制性酶切反应 46

实验十四 DNA片段的回收 47

实验十五 DNA的重组连接 48

实验十六 感受态细胞的制备和转化 51

实验十七 重组质粒的筛选与鉴定 53

实验十八 外源基因的诱导表达与检测 56

第四章 核酸分子杂交技术 63

实验十九 斑点及狭缝印迹杂交 64

实验二十 荧光原位杂交 66

第五章 DNA测序技术 70

实验二十一 DNA序列测定——末端终止法 70

实验二十二 DNA序列的自动化测序——化学降解法 73

第六章 蛋白质组学研究技术 77

实验二十三 双向凝胶电泳技术分析胃癌蛋白质组 78

实验二十四 免疫印迹法检测细胞中Bcl-2蛋白水平 80

第七章 生物芯片 84

实验二十五 乙型肝炎病毒基因分型芯片 85

实验二十六 液相芯片技术定量测定人血清AFP和CEA含量 88

第八章 其他分子诊断技术 92

实验二十七 PCR-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP） 93

实验二十八 PCR-单链构象多态性分析（PCR-SSCP） 96

实验二十九 等位基因特异性寡核苷酸杂交（PCR-ASO） 99

实验三十 甲基化特异性基因扩增 101

第九章 自主设计性实验 105

实验三十一 rhGM-CSF的制备 105

实验三十二 HPV的分型 105

实验三十三 MRSA感染的诊断 106

附录 107

附录一 核酸和蛋白质数据 107

附录二 常用试剂的配制 109

附录三 常用词汇的中英文对照 114

参考文献 116