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第一部分 运动预适应的心肌细胞保护作用与肾上腺髓质素研究进展 1

1．运动预适应的心肌细胞保护作用 1

1.1 细胞保护概述 1

1.2 缺血预适应与心肌细胞保护 1

1.3 运动预适应与心肌细胞保护 3

1.4 运动预适应研究中存在的问题和展望 7

2．肾上腺髓质素的研究进展 8

2.1 肾上腺髓质素的基因结构与表达调控 8

2.2 肾上腺髓质素的基因表达 11

2.3 肾上腺髓质素的来源 12

2.4 肾上腺髓质素受体 12

2.5 肾上腺髓质素的受体后信号转导 14

2.6 肾上腺髓质素的生物学作用 17

2.7 肾上腺髓质素与运动 18

3．运动预适应与肾上腺髓质素 20

4．参考文献 21

第二部分 运动预适应诱导心肌细胞保护作用的研究 32

1．前言 32

2．实验对象与方法 33

2.1 技术路线 33

2.2 实验仪器与试剂 34

2.3 动物分组 36

2.4 运动预适应动物模型的建立 36

2.5 ISO大鼠心肌缺血性损伤模型的制作 37

2.6 取材 37

2.7 实验方法 37

2.8 统计方法 39

3．实验结果 39

3.1 建模过程中大鼠状态的变化 39

3.2 建模过程中大鼠饮食量及体重的变化 40

3.3 大鼠血清cTnI的变化 40

3.4 大鼠心肌HE染色变化 41

3.5 大鼠心肌HBFP染色变化及计算机图像分析结果 42

3.6 大鼠心肌细胞超微结构的变化 45

4 分析与讨论 47

4.1 运动预适应动物模型的建立 47

4.2 运动预适应诱导的心肌细胞保护作用 50

5．结论 55

6．参考文献 55

第三部分 肾上腺髓质素介导运动预适应心肌细胞保护作用机制的研究 59

1．前言 59

2．实验对象与方法 60

2.1 技术路线 60

2.2 实验仪器与试剂 61

2.3 动物分组 63

2.4 动物模型的建立 63

2.5 实验方法 63

2.6 统计方法 70

3．结果 70

3.1 血清ADM含量的变化 70

3.2 心肌组织ADM含量的变化 71

3.3 心肌ADM mRNA表达的变化与计算机图像分析 71

3.4 心肌ADM免疫反应产物分布和表达的变化与计算机图像分析 74

4．讨论与分析 78

4.1 运动预适应对大鼠心肌细胞ADM mRNA表达的影响 78

4.2 运动预适应对大鼠肾上腺髓质素的影响 80

4.3 肾上腺髓质素在运动预适应心肌细胞保护中的作用和机制 82

5．结论 84

6．参考文献 84

全文总结 89

致谢 91

英文缩略词表 92

附录一 间歇运动对心肌肾上腺髓质素及其特异性受体RAMP2及CRLR的影响 94

1．材料和方法 94

1.1 动物及实验模型的建立 94

1.2 取材 94

1.3 心肌免疫印迹实验 94

1.4 统计学处理 95

2．结果 95

2.1 电泳分离心肌CRLR及RAMP2获得的蛋白结果 95

2.2 总蛋白中Beta-actin的表达 95

2.3 心肌CRLR及RAMP2蛋白的相对吸光值变化 96

3．讨论 96

3.1 间歇运动对ADM的影响 96

3.2 间歇运动对ADM特异性受体的影响 98

4．结论 99

5．参考文献 100

附录二 运动预适应对肾上腺髓质素特异性受体基因表达的影响 106

1．材料和方法 106

1.1 动物及实验模型的建立 106

1.2 取材 106

1.3 实时荧光定量RT-PCR实验 106

1.4 统计学处理 107

2．结果 107

3．讨论 108

3.1 运动预适应对心肌细胞产生保护作用 108

3.2 运动预适应上调ADM特异性受体基因的表达 109

4．结论 111

5．参考文献 111

附录三 间歇有氧运动降低血压的肾上腺髓质素机制 115

1．材料和方法 115

1.1 动物及实验模型的建立 115

1.2 动物取材 115

1.3 血脂及收缩压测定 115

1.4 心肌免疫组织化学实验 115

1.5 心肌免疫印迹实验 116

1.6 统计学处理 116

2．结果 116

2.1 血清ADM含量的测定 116

2.2 血脂及收缩压测定 117

2.3 心肌及冠状血管ADM表达 117

2.4 电泳分离心肌CRLR及RAMP2获得的蛋白结果 118

3．讨论 119

4．结论 120

5．参考文献 121

附录四 间歇有氧运动对高血压肾病大鼠肾上腺髓质素的影响 125

1．材料和方法 125

1.1 动物及实验模型的建立 125

1.2 动物取材 125

1.3 收缩压测定 125

1.4 血清ADM的测定 125

1.6 肾脏免疫印迹实验 126

1.7 统计学处理 126

2．结果 126

2.1 收缩压的测定 126

2.2 血清ADM含量的测定 127

2.3 肾脏ADM表达 127

2.4 电泳分离肾脏CRLR及RAMP2获得的蛋白结果 128

3．讨论 129

4．结论 131

5．参考文献 131

附录五 间歇有氧运动对自发性高血压大鼠血管肾上腺髓质素的影响 136

1．材料和方法 136

1.1 动物及实验模型的建立 136

1.2 动物取材 136

1.3 收缩压测定 136

1.4 血清ADM的测定 137

1.5 心肌免疫组织化学实验 137

1.6 心肌免疫印迹实验 137

1.7 统计学方法 137

2．结果 138

2.1 收缩压和血清ADM含量的测定 138

2.2 主动脉ADM表达 138

2.3 电泳分离主动脉CRLR及RAMP2获得的蛋白结果 139

3．讨论 140

4．参考文献 143

附录六 有氧运动减轻动脉粥样硬化斑块形成的研究进展 145

1．前言 145

2．有氧运动减轻AS斑块的研究 146

3．有氧运动影响AS斑块的最新发现 148

4．有氧运动逆转AS斑块的研究展望 149

5．参考文献 150