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实验室守则 1

实验内容概述 2

实验一 分子生物学实验常用仪器设备 4

实验二 培养基的配制与细菌的纯化培养 7

实验三 质粒的提取 10

实验四 目的基因PCR扩增及扩增产物回收 12

实验五 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 16

实验六 PCR扩增产物与T载体的连接 20

实验七 大肠杆菌感受态细胞的制备 24

实验八 重组质粒的构建及转化 26

实验九 阳性克隆的筛选鉴定 31

实验十 目的蛋白的诱导表达及检测 36

实验十一 蛋白质印迹法鉴定目的蛋白 41

实验十二 细胞中总RNA的提取 44

实验十三 逆转录PCR获取目的基因 47

实验十四 Dps融合表达载体的构建 49

实验十五 目的基因与融合表达载体重组、Dps融合蛋白诱导表达及检测 55

实验十六 目的蛋白的分离纯化 58

实验十七 目的蛋白的功能鉴定 63

参考文献 68

附录1 常用试剂及其配制 69

附录2 常用实验材料保存方法 80

附录3 常用仪器设备使用说明及使用注意事项 81

附录4 实验时间安排建议 88

附录5 实验小贴士 90

附录6 实验报告格式 91