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第一篇 DNA重组篇 1

实验一 溶液的配制与器材的准备 1

实验二 质粒DNA的提取与检测 10

实验三 PCR技术扩增目的基因 20

实验四 目的基因的回收与纯化 29

实验五 目的基因与质粒DNA的酶切分析 34

实验六 目的基因与质粒载体的连接和转化 40

实验七 重组质粒的鉴定 48

第二篇 原核表达篇 55

实验八 大肠杆菌表达载体的设计与构建 55

实验九 重组蛋白的诱导表达与SDS-PAGE检测 67

实验十 重组蛋白的分离纯化 76

实验十一 重组蛋白的活性分析 83

第三篇 植物转基因篇 88

实验十二 农杆菌介导法制作转基因植物 88

实验十三 植物基因组DNA的提取与检测 99

实验十四 植物总RNA的提取与检测 105

实验十五 Southern杂交检测外源基因的整合 109

实验十六 Northern杂交检测外源基因的转录 119

实验十七 RT-PCR技术检测外源基因的转录 122

实验十八 报告基因表达产物GUS的检测 128

实验十九 Western杂交检测外源基因的翻译 134

第四篇 杆状病毒篇 139

实验二十 重组杆状病毒的构建与制备 139

实验二十一 重组杆状病毒介导的蛋白质亚细胞定位 145

实验二十二 重组杆状病毒感染家蚕幼虫 150

第五篇 开放性实验篇 154

实验二十三 利用分子生物学技术鉴定纤维素降解微生物 154

实验二十四 利用DNA分子标记技术分析学生群体的遗传多样性 162

附录 171

附录一 常用培养基、试剂和缓冲液的配制 171

附录二 核酸和蛋白质数据 180

附录三 本书所用大肠杆菌菌株 182

附录四 常用分子生物学软件的使用 183

参考文献 187