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第一章 绪论 1

第一节 玉米深加工现状及发展趋势 1

1.1 玉米深加工综合利用现状 1

1.2 玉米深加工综合利用的主要内容 2

1.3 我国玉米深加工利用现状、存在的问题及对策 3

第二节 玉米发酵生产甘油研究现状及存在问题 4

2.1 甘油生产的方法 4

2.2 甘油发酵的历史 5

2.3 国外甘油发酵的研究现状 6

2.4 国内甘油发酵的研究现状 7

2.5 甘油供求情况 7

2.6 发酵法生产甘油经济效益分析 8

2.7 玉米发酵甘油存在的问题及对策 8

第三节 1,3-丙二醇生产及开发应用的现状及发展趋势 9

3.1 1,3-PD的理化性能与质量标准 9

3.2 1.3-PD的生产方法 9

第二章 玉米连续发酵生产1,3-丙二醇菌株选育及其最适发酵条件的建立 16

第一节 前言 16

第二节 玉米发酵生产甘油高产菌株的选育及其最适发酵条件的建立 17

2.1 材料与方法 18

2.2 结果与分析 19

2.3 结论 35

2.4 讨论 35

第三节 1,3-丙二醇高产菌株选育及其最适发酵条件的建立 37

3.1 材料与方法 37

3.2 结果与分析 38

3.3 结论 53

3.4 讨论 54

第三章 编码1,3-丙二醇氧化还原酶基因的克隆 59

第一节 前言 59

第二节 材料与方法 60

2.1 材料 60

2.2 方法 61

第三节 结果与分析 63

3.1 CpN-86菌株基因组DNA的提取 63

3.2 PCR法克隆dhaT基因 64

第四节 讨论 69

4.1 PCR法克隆dhaT基因 69

4.2 CpN-86菌株dhaT基因分析 70

第五节 结论 70

第四章 编码1,3-丙二醇氧化还原酶基因的表达及重组蛋白的分离与纯化 71

第一节 前言 71

第二节 dhaT基因表达载体构建 71

2.1 材料与方法 71

2.2 结果与分析 73

2.3 讨论 75

2.4 结论 75

第三节 dhdT基因表达及dhaT蛋白的分离与纯化 77

3.1 材料与方法 77

3.2 结果与分析 78

3.3 结论 79

第五章 编码1,3-丙二醇氧化还原酶基因表达蛋白的免疫学鉴定 80

第一节 前言 80

第二节 材料与方法 80

2.1 材料 80

2.2 方法 80

第三节 结果与分析 82

第四节 结论 83

第六章 总讨论 84

第一节 总设想的实施 84

1.1 玉米连续发酵生产1,3-丙二醇菌株选育及其最适发酵条件的建立 84

1.2 编码1,3-丙二醇氧化还原酶基因的克隆、测序、表达 84

第二节 后续问题 85

2.1 编码甘油脱水酶基因的克隆与表达 85

2.2 玉米直接转化为1,3-PD重组微生物构建 86

2.3 玉米糖直接发酵生产1,3-PD机制的探讨 86

2.4 1,3-PD的分离与纯化 86

第三节 前景展望 87

附录 基础分子生物学方法 89

参考文献 98