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第一章　分子杂交概论 1

第一节　分子杂交技术及其意义 1

目录 1

第二节　核酸分子杂交 2

第三节　核酸探针 7

第二章　原位杂交技术的基本理论 25

第一节　原位杂交技术的发展及研究历史 25

第二节　原位杂交技术的基本方法和主要内容 26

第二节　地高辛原位杂交技术的研究历史与发展 33

第三章　地高辛原位杂交技术 33

第一节　实验原理 33

第三节　实验所需设备、试剂及配制 36

第四节　详细实验步骤、结果及分析 39

第五节　实验中存在的问题和经验体会 43

第四章　荧光原位杂交技术 47

第一节　实验原理 47

第二节　荧光原位杂交技术的研究历史与发展 47

第三节　操作步骤 51

第四节　实验所需设备、试剂及配制 57

第五节　详细实验步骤、结果及分析 60

第六节　实验中存在的问题和经验体会 64

第五章　抑制消减杂交 66

第一节　抑制消减杂交的概念 66

第二节　抑制消减杂交产生的背景及内涵 66

第三节　抑制消减杂交的原理 68

第四节　抑制消减杂交实验操作步骤 73

第五节　结果与分析 79

第六节　问题与解答 82

第六章　辐射性杂交 88

第一节　辐射性杂交的基本原理与发展历程 88

第二节　构建辐射性杂交图谱的方法 91

第三节　辐射性杂交图谱的应用 95

第七章　反义核酸分子杂交技术及其应用 103

第一节 反义RNA 103

第二节 反义DNA 106

第三节　反义核酸的特性 107

第四节　人工合成反义寡核苷酸的类型 108

第五节　反义寡核苷酸的化学改造 109

第六节　制备反义寡核苷酸要考虑的因素 110

第七节　反义寡聚核苷酸导入细胞的方法 114

第八节　核酶 114

第九节　反义核酸分子杂交技术的应用 118

第八章　基因芯片固相分子杂交技术理论与进展 123

第一节　基因芯片的制备方法 123

第二节　基因芯片检测的样品制备 127

第三节　基因芯片杂交 129

第四节　基因芯片检测原理 129

第五节　基因芯片杂交的结果分析 132

第六节　基因芯片的应用 132

第七节 国内外基因芯片研究及开发情况 140

第九章　基因芯片分子杂交技术在脑出血周围带基因组分析中的应用 144

第一节　实验原理 144

第二节　材料和方法 144

第三节　实验结果 149

第四节　注意事项与经验体会 150

第十章　Southern印迹 152

第一节　实验原理 152

第二节　实验方法 152

第三节　实验结果及注意事项 160

第十一章　Northern印迹杂交 161

第一节　实验原理 161

第二节　实验方法 161

第十二章　Western印迹杂交 167

第一节　蛋白质样品的制备 168

第二节　蛋白质样品的分离——不连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 173

第三节　转移电泳 177

第四节　免疫检测 179

第五节　Western印迹应注意的问题和出现的异常情况及对策 181

第十三章　原位分子杂交单、双标技术的应用 185

第一节　原位杂交技术检测猫脊髓和背根节中NGF mRNA的表达 185

第二节　用免疫组化及原位杂交双标技术检测猫脊髓内NGF及其mRNA的表达 191