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第1章　分子生物学实验室规范及注意事项 1

1.1　分子生物学实验室常用仪器设备 1

1.2　分子生物学实验室操作规范 3

1.3　分子生物学实验注意事项 6

第2章 常用的检测分析方法 10

2.1　分光光度法 10

2.2 电泳 11

实验1 DNA浓度与纯度的紫外分光光度法分析 13

实验2　DNA的琼脂糖凝胶电泳 15

实验3　DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳 19

第3章　植物基因组DNA的提取及鉴定 22

3.1 植物基因组DNA 22

3.2　植物基因组DNA的提取技术 22

实验4 改进SDS法提取植物基因组DNA 23

实验5 CTAB法提取植物基因组DNA 28

第4章 动物基因组DNA的提取及鉴定 31

4.1 动物基因组DNA 31

4.2 动物基因组DNA的提取技术 31

实验6 动物组织基因组DNA的提取 32

实验7 血液基因组DNA的提取 35

第5章　微生物基因组DNA的提取及鉴定 38

5.1 微生物基因组DNA 38

5.2　微生物基因组DNA的提取技术 38

实验8 大肠杆菌基因组DNA的提取 40

实验9 酵母基因组DNA的提取 42

实验10　环境微生物基因组DNA的提取 44

第6章　质粒DNA的提取及鉴定 49

6.1 质粒 49

6.2 大肠杆菌质粒DNA的提取技术 50

实验11 碱裂解法小量制备质粒DNA 51

实验12　试剂盒抽提大肠杆菌质粒 55

实验13 质粒DNA的大量制备 57

第7章 哺乳动物组织总RNA的提取及鉴定 59

7.1 哺乳动物组织总RNA 59

7.2 哺乳动物组织总RNA的提取技术 59

7.3 总RNA提取中的关键问题 60

实验14 哺乳动物组织总RNA的提取 60

第8章　PCR基因扩增及检测 65

8.1 PCR技术的原理 65

8.2　PCR技术的发展历程 65

8.3　PCR技术的种类 67

实验15 绿色荧光蛋白基因的PCR扩增 67

实验16　乳铁蛋白基因的PCR扩增 69

实验17 查尔酮合成酶基因的PCR扩增 72

实验18　逆转录PCR扩增 74

第9章　分子杂交 79

9.1　分子杂交的原理 79

9.2　分子杂交的发展历程 79

9.3　分子杂交的种类 80

实验19　Southern杂交 80

实验20　Northern杂交 84

实验21　Western杂交 87

第10章 限制性内切酶消化 91

10.1 限制性内切酶的发现 91

10.2 限制性内切酶的命名及种类 91

10.3　限制性内切酶的反应体系 92

10.4　限制性内切酶酶切图谱 92

实验22　质粒的限制性内切酶消化 93

实验23　λDNA的限制性内切酶消化 95

第11章 目的基因的分离纯化 98

实验24 乙醇沉淀法纯化PCR扩增产物 99

实验25 硅胶膜吸附法纯化PCR扩增产物 101

实验26　外源DNA的琼脂糖凝胶电泳回收 103

第12章 DNA的体外重组 105

12.1　常用的载体 105

12.2　外源DNA与载体的连接方法 105

实验27　PCR产物直接克隆 107

实验28　黏性末端的连接 110

第13章　感受态细胞的制备及转化 112

13.1　转化 112

13.2　感受态细胞的制备方法 112

实验29　大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 113

实验30　重组DNA的蓝白斑筛选 116

第14章　外源基因的诱导表达 119

14.1　表达系统 119

14.2　表达载体 120

14.3　外源基因诱导表达的优化 121

实验31　外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 122

实验32　蛋白质的SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳 124

第15章　基因文库的构建 128

15.1　基因文库的构建方法 128

15.2　基因文库的应用 129

实验33　植物cDNA文库的构建 130