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第一篇 常用分子生物学实验技术及原理 1

第一章 载体 1

第二章 分子生物学中常用的工具酶 6

第三章 电泳 13

第四章 真核生物基因文库的构建 19

第五章 cDNA文库的构建 23

第六章 DNA序列测定 27

第七章 PCR基因扩增 33

第八章 基因表达 37

第九章 印迹法及分子检测 41

第十章 克隆化DNA的定点突变 47

第二篇 学生实验 53

实验一 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 53

实验二 质粒DNA的提取及酶切 56

实验三 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 59

实验四 DNA重组 62

实验五 哺乳动物基因组DNA的提取 66

实验六 植物基因组DNA的提取 69

实验七 植物总RNA的提取 71

实验八 酵母tRNA的制备(苯酚法) 74

实验九 鼠肝氨酰tRNA合成酶的制备及tRNA接受氨基酸活力的测定 77

实验十 DNA序列测定--双脱氧链终止法 81

实验十一 DNA序列测定--银染色法 86

实验十二 PCR基因扩增 90

实验十三 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 93

实验十四 蛋白质印迹 98

实验十五 Southern杂交 104

实验十六 利用聚合酶链式反应(PCR)定点突变 110

实验十七 寡核苷酸介导的定点突变 114

附录 119

附录一 分子生物学实验中的常用数据及换算关系 119

附录二 分子生物学实验中的常用试剂及溶液、缓冲液 122

附录三 与分子生物学实验相关的实验资料 130