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第一章 基本型细胞实验 1

第一节 细胞的形态、结构观察及组成显示 1

实验1血细胞装片和涂片的制备及染色观察 2

实验2植物细胞的叶绿体、线粒体及液泡观察 5

实验3青蛙或蟾蜍胸骨剑突软骨细胞高尔基体的中性红染色 6

实验4马铃薯和花生徒手切片的制备及细胞内多糖、脂肪的染色 7

实验5孚尔根法显示细胞中的DNA 9

实验6甲基绿-派洛宁染色法显示细胞中的DNA和RNA 10

实验7考马斯亮蓝染色法显示洋葱鳞茎内表皮及小鼠巨噬细胞的细胞骨架 11

实验8酸性磷酸酶法显示巨噬细胞溶酶体 15

实验9细胞中过氧化物酶体的显示 16

实验10酶免疫细胞化学法显示人T细胞表面CD3分子 18

实验11细胞大小的显微测量 19

第二节 细胞计数 21

实验12常规血细胞计数板计数 21

第三节 细胞生理 23

实验13哺乳动物红细胞膜的通透性检测 23

实验14植物细胞质壁分离现象观察及质壁分离法测定基态渗透值 24

实验15小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察及吞噬活性检测 26

实验16台盼蓝染料排除法检测活细胞比率 28

第四节 细胞分裂 30

实验17压片法制备植物细胞分裂标本片及分裂各期细胞特征观察 30

实验18滴片法制备动物细胞分裂标本片及细胞分裂指数分析 32

第五节 细胞裂解及效果检测 34

实验19小鼠腹水瘤细胞裂解及乳酸脱氢酶活性检测 35

第六节 细胞器的分离 36

实验20植物细胞叶绿体的分离 37

实验21动物细胞线粒体的分离 38

第七节 细胞融合 40

实验22PEG介导的细胞融合实验 41

第二章 综合型细胞实验 43

第一节 细胞的分离与分选 43

实验23密度梯度离心法分离血液单个核细胞 44

实验24免疫磁珠分选法分离小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞 46

实验25T细胞的免疫荧光标记及流式细胞仪分选实验 48

第二节 细胞培养相关实验 50

实验26贴壁细胞的原代培养实验 51

实验27贴壁细胞的传代培养实验 54

实验28细胞冻存与解冻复苏实验 56

实验29动物外周血细胞培养及染色体制备实验 59

第三节 细胞增殖及细胞活力检测实验 61

实验30MTT比色法检测细胞增殖与活力 62

实验31CCK-8法检测细胞增殖与活力 63

第四节 细胞黏附与迁移分析 65

实验32肿瘤细胞黏附能力分析实验 66

实验33检测肿瘤细胞侵袭能力的Transwell小室实验 67

实验34肿瘤细胞迁移的划痕实验 69

第五节 细胞的激活及信号转导分子检测 70

实验35利用钙离子荧光探针检测细胞内Ca2+浓度 71

实验36信号蛋白磷酸化水平检测实验 73

实验37转录因子NF-κB活性检测实验 75

第六节 哺乳动物细胞转基因及表达检测 77

实验38绿色荧光蛋白基因转染体外培养的小鼠成纤维细胞及表达检测 78

第七节 细胞周期调控及检测 80

实验39利用流式细胞术分析细胞周期时相 81

实验40细胞周期蛋白D1基因转染细胞及细胞周期检测 84

实验41胸腺嘧啶脱氧核苷（TdR）双阻断法同步化培养的动物细胞 86

实验42秋水仙胺阻抑法分离贴壁培养的哺乳动物M期细胞 88

实验43植物细胞中期同步化诱导 89

第三章 开放探索型细胞实验 91

第一节 细胞凋亡及细胞胀亡的诱导及检测 91

实验44凋亡细胞及胀亡细胞的形态学检测 92

实验45Annexin V-FITC/PI双染色法检测凋亡与胀亡细胞 94

实验46凋亡细胞DNA的电泳检测 96

实验47TUNEL技术原位检测凋亡细胞 98

第二节 细胞自噬的诱导及检测 101

实验48MDC染色法检测巨噬细胞自噬现象 102

实验49GFP-LC3基因转染法显示自噬体 104

第三节 细胞衰老的诱导与检测 105

实验50细胞ROS的流式细胞仪检测 106

实验51H2O2诱导细胞衰老及胞内衰老相关的β-半乳糖苷酶检测 108

第四节 细胞分化的诱导及检测 110

实验52骨髓造血干细胞的诱导分化实验 112

实验53视黄酸诱导肿瘤细胞分化及检测实验 115

第五节 小干扰RNA引起的基因沉默实验 117

实验54RNA干扰沉默绿色荧光蛋白基因 118

第六节 细胞端粒酶活性检测实验 120

实验55肿瘤细胞的端粒酶活性检测 121

第四章 细胞生物学著名的实验发现 124

一、细胞膜磷脂双层的发现 125

二、线粒体的发现与功能研究 126

三、溶酶体的发现 126

四、高尔基体的发现 127

五、细胞周期调控的发现 127

六、照亮细胞的绿色荧光蛋白 128

七、细胞凋亡与线虫 129

八、蛋白质的地址签 129

第五章 细胞生物学先进仪器设备 131

第一节 细胞观察仪器 131

一、相差显微镜 131

二、透射电子显微镜 132

三、激光扫描共聚焦显微镜 134

四、超高分辨率荧光显微镜 139

五、高内涵细胞成像和分析系统 142

第二节 细胞分选设备 145

一、流式细胞仪 145

二、细胞磁分选仪 148

第三节 细胞破碎设备 150

第四节 细胞切片制作设备 151

第五节 细胞酶活等分析设备 152

附录一 本书常用溶液配制方法 155

附录二 腹水瘤小鼠模型建立方法 157

附录三 细胞培养前的准备工作 158