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1维管组织定位表达启动子研究 1

1.1植物基因启动子研究进展 1

1.1.1植物基因启动子核心结构及其功能 1

1.1.2植物基因启动子分类 3

1.1.3组织特异性启动子 8

1.1.4植物基因启动子的人工改造及其应用前景 11

1.2维管组织定位启动子研究进展 13

1.2.1维管组织特异性定位启动子研究的概述 13

1.2.2特异性定位启动子序列的调控元件研究 16

1.2.3小分子蛋白与特异性定位表达基因的启动子的作用 17

1.3木本植物维管组织特异性启动子GRP1.8启动子与4CL1启动子的研究 19

1.3.1木本植物维管组织特异性启动子GRP1.8启动子的研究 19

1.3.2木本植物维管组织特异性启动子4CL1启动子的研究 23

1.4结束语 26

24-香豆素辅酶A-连接酶1（4CL1）基因克隆表达、分离纯化与结构模型的构建 27

2.1木质素研究进展 27

2.1.1木质素的生物合成途径 27

2.1.2苯丙基酶4-香豆素-辅酶A连接酶的结构与功能 29

2.2毛白杨4CL1基因的克隆与分析 33

2.2.14CL1基因的克隆与酶活性分析 33

2.2.24CL蛋白结构模拟 36

2.2.3酶分子与底物结合活性分析 39

3形成层定位启动子表达4CL1基因调控植物木质素代谢途径研究 42

3.1基因工程调节木质素合成进展 42

3.2转基因树木提高木质素含量的研究 45

3.3转基因树木降低木质素含量研究 52

3.3.1反义基因结构的构建 5

3.3.2反义融合表达载体的构建 55

3.3.3转基因烟草、毛白杨与刺槐研究 55

4研究方法概论 58

4.1原理部分 58

4.1.1植物分子生物学中常用的受体菌 58

4.1.2植物分子生物学中常用的载体 60

4.1.3植物分子克隆中常用的工具酶 6

4.1.4凝胶电泳 71

4.1.5聚合酶链式反应（PCR技术） 76

4.1.6基因克隆技术 80

4.1.7植物基因组文库与CDNA文库的构建 83

4.1.8核酸分子杂交 91

4.1.9外源基因的表达 96

4.1.10植物转基因技术 100

4.2实验部分 104

实验一琼脂糖凝胶电泳 104

实验二植物总DNA的制备 106

实验三植物总RNA提取 109

实验四植物mRNA的分离纯化一磁珠法 110

实验五植物cDNA文库的构建 111

实验六聚合酶链式反应（PCR）技术 116

实验七DNA重组技术 117

实验八大肠杆菌感受态细胞的制备及外源DNA的转化 119

实验九质粒DNA的制备 120

实验十SDS-PAGE凝胶蛋白电泳分析样品 122

实验十一外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 123

实验十二农杆菌感受态的制备及质粒向农杆菌的转化 124

实验十三农杆菌叶盘法转化烟草 124

实验十四Southe杂交技术检测外源基因的整合 125

实验十五4CL高效表达，纯化与酶活性测定 129

实验十六植物纤维素与木质素含量测定 130

参考文献 132

符号、缩略词、术语注释表 146

后记 148