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第一章 实验基本知识与基本操作 1

第一节 实验室安全和防护知识 1

第二节 基础实验操作技能 5

第三节 基本单元操作 21

实验1 微量移液器的使用 21

实验2 单菌落的分离 23

实验3 过夜悬浮培养与对数期培养 26

Ⅰ 过夜悬浮培养 26

Ⅱ 对数期培养 28

第二章 糖类物质的检测与分析 30

实验4 糖的旋光性和变旋现象 30

实验5 还原糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法 31

实验6 粗淀粉的测定——1％盐酸旋光法 33

实验7 血糖的测定 35

Ⅰ 磷钼酸比色法 35

Ⅱ 蒽酮比色法 37

Ⅲ 葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法（GOD-POD法） 39

第三章 脂类物质的检测与分析 42

实验8 粗脂肪含量的测定——索氏抽提法 42

实验9 脂肪酸值的测定——碱滴定法 43

实验10 油脂皂化与皂化值的测定 46

实验11 碘价的测定（Hanus法） 47

实验12 血清胆固醇的测定 49

Ⅰ 化学比色法 49

Ⅱ 酶法 50

实验13 脂肪酸的β-氧化 52

实验14 尿中17-羟皮质类固醇的测定——Porter-Silber反应 54

第四章 氨基酸的检测与分析 57

实验15 纸层析法分离鉴定氨基酸 57

实验16 甲醛滴定法测定氨基氮含量 59

实验17 赖氨酸含量的测定 61

实验18 瓦氏呼吸计法测定L-谷氨酸的含量 63

第五章 蛋白质的分离制备与分析 67

实验19 蛋白质的两性反应与等电点的测定 67

实验20 蛋白质和氨基酸的呈色反应 69

实验21 蛋白质含量测定（一）——微量凯氏定氮法 73

实验22 蛋白质含量测定（二） 77

Ⅰ 双缩脲法 77

Ⅱ 考马斯（Coomassie）亮蓝G-250法（Bradford法） 79

Ⅲ Folin试剂法 81

Ⅳ BCA法 83

Ⅴ 紫外（UV）吸收测定法 84

实验23 酪蛋白的制备 87

实验24 凝胶层析法分离蛋白质 88

实验25 血红蛋白的凝胶过滤 91

实验26 蛋白质相对分子质量的测定——SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法 93

实验27 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳 101

实验28 血清蛋白质乙酸纤维薄膜电泳 104

实验29 血浆脂蛋白的分离——琼脂糖凝胶电泳法 106

第六章 酶的分离制备与分析 109

实验30 pH值对酶活性的影响 109

实验31 温度对酶活性的影响 110

实验32 氨基移换反应——血液中转氨酶活性的测定 112

实验33 乳酸脱氢酶及其辅酶的作用 114

实验34 过氧化氢酶的作用 115

实验35 过氧化物酶的作用 116

实验36 细胞色素氧化酶的作用 117

实验37 液化型淀粉酶活性的测定 119

实验38 糖化型淀粉酶活性的测定 121

实验39 大麦萌发前后淀粉酶活性的测定 123

实验40 发色底物测定大曲中的α-1,4-葡萄糖苷酶活性 126

实验41 枯草杆菌蛋白酶活性测定 127

实验42 溶菌酶结晶的制备及活性测定 129

实验43 脂肪酶活性测定 133

实验44 用正交法测定几种因素对酶活性的影响 134

第七章 维生素的检测分析 138

实验45 维生素B1的荧光测定 138

实验46 维生素B2的测定 140

实验47 植物中抗坏血酸含量的测定 143

实验48 维生素A的测定 144

第八章 核酸的分离与分析 148

实验49 离子交换层析分离核苷酸 148

实验50 核酸的定量测定（定磷法） 151

实验51 酵母RNA的分离与组分鉴定 152

实验52 核苷酸的纸电泳 155

实验53 紫外吸收法测定核酸的含量 156

实验54 RNA与DNA的测定 158

实验55 DNA的琼脂糖凝胶电泳 161

实验56 质粒DNA的微量制备（碱裂解法、煮沸法） 164

实验57 质粒DNA的酶切鉴定及琼脂糖凝胶电泳 169

实验58 质粒DNA的大量制备与纯化 171

实验59 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 175

实验60 PCR基因扩增 179

实验61 哺乳动物基因组DNA的提取 181

实验62 植物基因组DNA的提取 184

实验63 植物总RNA的提取与电泳 186

实验64 RNA的蔗糖密度梯度离心分离 188

实验65 组织和细胞RNA的制备 190

第九章 综合性、设计性实验 193

实验66 鸡卵类黏蛋白的分离纯化 193

实验67 纤维素酶活性测定及pH值对其活性的影响 198

实验68 酪氨酸酶的提取及其催化活性研究 201

实验69 固定化酵母细胞及蔗糖酶的检测 205

实验70 发酵过程中无机磷的利用和ATP的生成 207

附录1 生物化学实验室规则 210

附录2 玻璃、塑料器皿的清洗与处理 211

附录3 实验样品的准备 213

附录4 实验常用缓冲液的配制 215

附录5 实验室中常用参数 224

附录6 实验误差与提高实验准确度的方法 225

附录7 实验记录与实验报告 230

参考文献 233