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第1章 干细胞系的质量控制程序 1

1.1 导言 1

1.2 细胞入库原则 3

1.3 细胞特性 4

1.4 无菌 11

1.5 支原体检测 12

1.6 其他微生物污染和潜在的生物危害 13

1.7 培养条件、试剂及培养基的质量控制 14

1.8 结论 14

参考文献 14

附录1使用Ⅱ类生物安全橱时的某些注意事项 18

第2章 人胚胎干细胞系：衍生与培养 19

2.1 引言 20

2.2 细胞培养基成分 24

2.3 小鼠胚胎饲养细胞（MEF）的制备 25

2.4 人胚胎干细胞的诱导 31

2.5 人胚胎干细胞的增殖 33

2.6 hES细胞的冻存 37

2.7 hES细胞的特性鉴定 40

2.8 利用hES细胞进行分化研究 46

2.9 材料来源 48

参考文献 50

第3章 人EC和ES细胞神经分化技术 54

3.1 引言 55

3.2 其他方法 57

3.3 方法的原理和优势 58

3.4 培养基和试剂的准备 58

3.5 细胞培养 60

3.6 冻存 61

3.7 分化 62

3.8 分析 68

3.9 高通量筛选 75

3.10 材料来源 78

参考文献 79

第4章 人胚胎干细胞向心肌细胞的分化 83

4.1 引言 83

4.2 方法概述 84

4.3 培养基与试剂的准备 85

4.4 hESC分化为心肌细胞的操作方案 87

4.5 材料来源 94

参考文献 95

第5章 人生殖细胞谱系的培养 97

5.1 引言 98

5.2 培养基及试剂配制细则 100

5.3 细胞培养方法学 101

5.4 培养物鉴定与特性分析 109

5.5 人生殖细胞培养物的分化 116

5.6 冻存 118

5.7 材料来源 118

参考文献 119

第6章 人胚胎癌（EC）干细胞系的来源和培养 121

6.1 背景知识 121

6.2 试剂的准备 123

6.3 方案 125

6.4 特征 131

6.5 低温保存 140

6.6 材料来源 141

参考文献 142

第7章 脐带和脐血来源干细胞的培养 144

7.1 背景介绍 145

7.2 培养基和试剂的制备 147

7.3 具体方案 149

7.4 脐带来源细胞的生物学特征 161

7.5 材料来源 165

参考文献 166

第8章 牙髓多能干细胞 170

8.1 背景介绍 171

8.2 培养基与试剂的制备 172

8.3 培养的具体方案 174

8.4 分化潜能与鉴定 181

8.5 讨论 184

8.6 材料来源 184

参考文献 185

第9章 骨髓基质来源的间充质干／祖细胞（MSCs）的培养基本原则和鉴定 188

9.1 引言 189

9.2 培养基和试剂的准备 189

9.3 分离人骨髓细胞用于MSCs扩增 191

9.4 处理人骨髓细胞用于MSCs培养 191

9.5 MSCs培养物的扩增和冻存 194

9.6 鉴定 197

9.7 附加方案：大鼠MSCs的获得和扩增 204

9.8 MSCs扩增技术注释 206

9.9 概要和评述 207

9.10 材料来源 207

参考文献 208

第10章 软结缔组织干／祖细胞的分离、鉴定和培养 212

10.1 研究背景 212

10.2 培养基和试剂准备 214

10.3 从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞 215

10.4 从人胎儿软骨中分离软骨祖细胞 219

10.5 从人滑膜中分离祖细胞 221

10.6 材料来源 223

参考文献 224

第11章 人角膜干细胞的培养 225

11.1 概述 226

11.2 培养基和试剂的配制 230

11.3 人角膜缘干细胞（LSC）的培养 233

11.4 培养人角膜间质干细胞 238

11.5 人角膜内皮干细胞的培养 244

11.6 小结 247

11.7 材料和供应商清单 248

参考文献 250

第12章 乳腺干细胞的培养 255

12.1 培养干细胞的必要性 255

12.2 乳腺干细胞存在的证据 256

12.3 乳腺细胞培养基的组成 258

12.4 乳腺干细胞培养模式 260

12.5 结果矛盾还是数据不同 267

12.6 结论 269

12.7 材料来源 269

参考文献 270

第13章 脂肪来源干细胞的组织培养 274

13.1 背景知识 274

13.2 培养基和试剂的准备 275

13.3 取材和细胞分离 277

13.4 脂肪干细胞培养和扩增 278

13.5 ASCs的特征及分化 280

13.6 材料来源 283

参考文献 283

缩略语 286

索引 290