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第一章 生物技术基本原理 1

第一节 概述 1

一、生物技术及其研究意义 1

二、生物技术研究现状与发展 1

第二节 基本原理 3

一、核酸研究基本技术 3

二、蛋白质研究基本技术 10

三、细胞研究基本技术 14

第三节 生物信息技术 20

一、生物信息学 20

二、相关生物学数据库 21

第二章 生物技术实验基本知识 24

第一节 实验常识 24

一、实验须知 24

二、实验报告 25

第二节 生物技术实验设计 25

一、实验设计的目的与意义 25

二、实验设计的基本内容 26

第三章 生物技术实验方法 28

第一节 核酸研究技术相关实验 28

实验一 动物组织细胞内DNA的分离和含量测定 28

实验二 质粒的提取和纯化 30

实验三 核酸的琼脂糖凝胶电泳 31

实验四 人类基因组DNA的提取 34

实验五 DNA的琼脂糖凝胶电泳 36

实验六 聚合酶链式反应（PCR） 37

实验七 利用PCR-RFLP技术检测人MTHFR基因多态性 39

实验八 利用PCR-EMSA技术检测人OPB7基因启动子活性 41

第二节 蛋白质研究技术相关实验 43

实验九 蛋白质的两性反应和等电点测定 43

实验十 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质 45

实验十一 葡聚糖凝胶层析分离蛋白质 48

实验十二 Lowry氏法测定蛋白质含量 50

实验十三 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳 53

实验十四 ELISA法（双抗体夹心法）检验IL-2 55

实验十五 温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响 57

实验十六 酵母蔗糖酶米氏常数（Km）的测定 59

实验十七 血清乳酸脱氢酶同工酶的分离 62

实验十八 抗核抗体的检验 65

实验十九 胶体金技术 66

实验二十 琼脂扩散试验 67

实验二十一 对流免疫电泳试验 70

实验二十二 火箭电泳试验 72

实验二十三 玻片凝集反应 73

实验二十四 间接血细胞凝集试验 75

实验二十五 免疫印记法 76

第三节 细胞研究技术相关实验 78

实验二十六 感受态细胞的制备和转化 78

实验二十七 人外周血淋巴细胞染色体标本制备及核型分析 80

实验二十八 G显带染色体标本制备与识别 82

实验二十九 光学显微镜的构造原理和使用方法 84

实验三十 动物细胞的显微测量 89

实验三十一 细胞形态结构的观察和细胞计数 90

实验三十二 细胞组分的分级分离 94

实验三十三 细胞组分的化学反应 96

实验三十四 细胞的原代培养和传代培养 97

实验三十五 细胞融合 99

实验三十六 特异性细胞免疫 100

实验三十七 淋巴细胞转化试验 102

实验三十八 人外周血T细胞亚群及NK细胞的检测 103

第四节 其他实验 105

实验三十九 动物血清过敏症 105

实验四十 维生素C的性质与食物中维生素C含量的测定 106

第五节 综合性设计性实验 109

实验四十一 血清白蛋白、γ-球蛋白的分离纯化及鉴定 109

实验四十二 心肌组织双向电泳分析；GOT提取、纯化、鉴定及活性检测 110

实验四十三 基因工程生产人类EPO的实验设计 110

实验四十四 抗独特型单克隆抗体的制备与检测 110

实验四十五 苯丙酮尿症的实验室诊断 110

实验四十六 先天愚型的产前诊断 111

实验四十七 肝癌细胞蛋白表达谱的分析 111