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第一章 生物化学实验基本方法 1

第一节　实验室规划 1

第二节　实验室安全及防护常识 2

一、实验室安全知识 2

二、实验室急救 2

第三节　实验记录与实验报告 5

一、实验记录 5

二、实验报告 6

第四节　实验室常用仪器的使用 7

一、计量仪器 7

二、台秤 10

三、分析天平 11

四、电子分析天平 13

五、恒温箱 13

六、电热恒温水浴 14

七、分光光度计 14

八、电动离心机 16

九、酸度计（DELTA 320-S pH计） 17

十、自动部分收集器 18

第五节 实验室基本操作和实验室常识 19

一、液体的盛放和储存 19

二、器皿的清洗与干燥 19

三、配制溶液 20

四、搅拌与振荡 22

五、沉淀的过滤和洗涤 23

六、实验室常识 24

第二章 现代生物化学基本实验技术 25

第一节　层析技术 25

一、基本原理 25

二、层析法的分类 25

三、离子交换层析 26

四、凝胶层析 30

五、亲和层析 36

六、高效液相色谱 39

七、分配层析 40

第二节　离心技术 44

一、基本原理 44

二、离心机的类型 44

三、制备性超速离心的分离方法 46

四、离心操作的注意事项 47

第三节　电泳技术 48

一、基本原理 48

二、电泳技术的分类和特点 49

三、影响电泳的因素 49

四、常用电泳技术 50

第四节　分光光度技术 52

一、基本原理 53

二、分光光度计的结构 54

三、分光光度技术的应用 56

第五节　免疫化学技术 57

一、免疫化学技术简介 57

二、抗原的免疫原性和专一性 57

三、抗体的结构和功能 58

四、抗原抗体的结合 59

五、动物的常规免疫 61

六、双向免疫扩散及免疫电泳 62

七、酶联免疫吸附分析 63

第三章 生物化学与生化药品基础实验 65

实验一　总糖和还原糖的测定（一） 65

实验二　总糖和还原糖的测定（二） 68

实验三　粗脂肪的测定 70

实验四　血清总胆固醇的测定 72

实验五　脂肪碘值的测定 74

实验六 氨基酸分离与鉴定——双向层析 76

实验七 蛋白质的定量测定（一）——凯氏定氮法 79

实验八　蛋白质的定量测定（二）——Folin-酚法 82

实验九 蛋白质的定量测定（三）——考马斯亮蓝染色法 84

实验十　牛乳中酪蛋白的制备 86

实验十一　质粒DNA的微量制备 87

实验十二 小牛胸腺DNA的制备——浓盐法 90

实验十三 核酸的定量测定（一）——紫外吸收法 92

实验十四 核酸的定量测定（二）——定磷法 94

实验十五　核酸的定量测定（三）——定糖法（地衣酚法） 96

实验十六　酶的特性——底物专一性 98

实验十七 底物浓度对酶促反应速度的影响 100

实验十八　淀粉酶活力测定 102

实验十九　影响酶促反应的因素 103

实验二十　果蔬维生素C定量测定 106

实验二十一　糖酵解中间产物的鉴定 109

实验二十二　肌糖原的酵解作用 111

实验二十三　脂肪酸的β-氧化 113

实验二十四 氨基移换反应（一） 115

实验二十五　氨基移换反应（二） 117

第四章 生物化学技术性实验 119

实验二十六　蛋白质相对分子质量的测定 119

实验二十七 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白 126

实验二十八　不同分子量蛋白质的分离——凝胶柱层析法 129

实验二十九　醋酸纤维素薄膜分离血清蛋白 132

实验三十 离子交换层析分离氨基酸 134

第五章　生化药物综合性实验 136

实验三十一 酵母RNA的提取及组分鉴定 136

实验三十二　血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定 138

实验三十三 胰蛋白酶的制备及活力的测定 142

附录 145

一、常用缓冲液的配制方法 145

二、常用酸碱指示剂的配制方法 146

参考文献 147