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第一编 生物化学基本技能及操作 1

实验1 基本操作和实验室常识 1

一、基本操作 1

二、实验室常识 3

实验2 光谱光度法 4

一、原理 4

二、光电比色计和可见光分光光度计 6

三、紫外分光光度计 12

实验3 层析技术 13

一、氨基酸的单向纸上层析 14

二、氨基酸的硅胶薄层层析 17

三、葡聚糖凝胶柱层析分离核黄素和血红蛋白 18

四、凝胶层析分离丙种球蛋白与核黄素 20

实验4 离心技术 24

一、离心分离法分离血浆球蛋白和清蛋白 25

二、差速离心法分离亚细胞结构 27

实验5 电泳技术 28

一、琼脂糖凝胶电泳分离血清脂蛋白 30

二、血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳 31

三、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质 34

第二编 生物化学的基础实验 42

实验1 蛋白质的颜色反应 42

实验2 蛋白质的盐析 44

实验3 蛋白质含量测定——紫外分光光度法 45

实验4 蛋白质含量测定——改良Lowry法 46

实验5 血清总蛋白测定——双缩脲法 50

实验6 蛋白质等电点的测定 52

实验7 核酸组分的鉴定 54

实验8 维生素C的测定——2,4-二硝基苯肼法 55

实验9 温度、pH对酶活性的影响 58

实验10 Km值测定——脲酶Km值的简易测定法 60

实验11 激动剂和抑制剂对酶活性的影响及酶的特异性 62

实验12 汞盐对脲素酶的抑制作用及其解除 64

实验13 乳酸脱氢酶及其辅酶 66

实验14 血清淀粉酶（AMS）碘-淀粉比色法 68

实验15 细胞色素体系的作用及其抑制与解除 70

实验16 血清葡萄糖的测定 73

实验17 糖耐量试验 77

实验18 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 78

实验19 血清中胆固醇的测定 79

实验20 血浆中磷脂的测定 81

实验21 酮体的生成及定性实验 83

实验22 血清中谷丙转氨酶的测定 84

实验23 血清中谷草转氨酶的测定 87

实验24 血清中无机磷的测定 88

实验25 血清中尿素氮的测定 91

实验26 血浆（清）中碳酸氢根的测定 93

实验27 血清中钙离子的测定 94

实验28 血清中锌离子的测定 95

实验29 羟基磷灰石柱层析法分离鼠肝中RNA和DNA 98

实验30 氯化物的测定 99

第三编 生物化学的综合实验 102

实验1 血清γ-球蛋白的分离、纯化及鉴定 102

实验2 核酸的提取、分离及鉴定 106

实验3 亚麻子油脂肪酸的制备及定量测定 110

实验4 离子交换层析法——乳汁过氧化物酶的纯化 114

第四编 分子生物学实验 123

实验1 SDS碱裂解法制备质粒DNA 123

实验2 质粒DNA的酶切与琼脂糖电泳鉴定 128

实验3 从琼脂糖凝胶中分离回收DNA片段 130

实验4 DNA片段的连接反应 135

实验5 用重组质粒DNA转化大肠杆菌 136

实验6 聚合酶链反应技术（PCR） 139

实验7 蛋白质免疫印迹分析 142

实验8 Southern印迹法 147

实验9 Northern印迹法 152

附 聚丙烯酰胺凝胶电泳银染分析DNA 156

附录Ⅰ 常用缓冲溶液及酸碱指示剂的配制方法 160

附录Ⅱ 几种动物生化常数表 164

附录Ⅲ 离心机转速（n）与相对离心力（RCF）的换算 166