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模块一 核酸提取与分子杂交 1

1-1 DNA的提取与Southern杂交 4

1-2 RNA的提取与Northern杂交 21

1-3 原位杂交分析 36

模块二 目的基因的合成及检测 53

2-1 cDNA末端快速扩增法合成目的基因 56

2-2 目的基因的克隆 64

2-3 目的基因的序列分析 75

模块三 大规模基因差异表达分析 79

3-1 抑制消减文库的建立 82

3-2 特异基因的序列测定 91

3-3 序列比对与基因注释 94

3-4 基因芯片分析 98

模块四 目的蛋白质表达、纯化与检测 103

4-1 目的基因原核表达质粒的构建 106

4-2 谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白的表达与纯化 111

4-3 组氨酸标签融合蛋白的表达与纯化 115

4-4 免疫印迹检测目的蛋白质的表达 118

模块五 蛋白质样品的制备、分离与鉴定 123

5-1 蛋白质样品的制备 126

5-2 蛋白质的定量 130

5-3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 133

5-4 双向电泳分离蛋白质 139

5-5 二维液相色谱分离蛋白质 148

5-6 蛋白质的质谱鉴定 155

模块六 蛋白质相互作用的研究 161

6-1 酵母双杂交 164

6-2 T7噬菌体展示筛选技术 175

6-3 Pull-down分析蛋白质相互作用 185

6-4 免疫共沉淀 194

模块七 分子标记技术的比较与应用 200

7-1 SSR分子标记技术 203

7-2 改良AFLP分子标记技术 207

7-3 相关分子标记技术概述 213

模块八 目的基因的遗传转化 215

8-1 PCR法克隆目的基因全长 218

8-2 Gateway技术构建表达载体 221

8-3 农杆菌真空渗入法遗传转化 225

8-4 水稻愈伤组织的遗传转化 229

8-5 RNAi发夹式载体的构建及转化 235

模块九 激光扫描共聚焦显微镜的应用 240

9-1 激光扫描共聚焦显微镜的基本使用 243

9-2 花粉管内钙离子梯度分布的观察 248

9-3 激光扫描共聚焦显微镜检测荧光蛋白 254

模块十 生物信息学与网络应用 259

10-1 基因序列分析 262

10-2 蛋白质结构以及相互作用预测 270

附录 274