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第一章 概述 1

1.1 研究方法 1

1.2 总体结果 9

1.3 分析与讨论 45

第二章 基础分子生物学技术 47

2.1 限制性内切核酸酶 47

2.2 DNA文库 50

2.3 Southern印迹 53

2.4 Northern印迹 56

2.5 Western印迹 60

2.6 二维凝胶电泳 63

2.7 转染 67

2.8 系列传代 70

2.9 细胞融合 74

2.10 融合蛋白 77

2.11 原位杂交 81

2.12 荧光原位杂交 85

2.13 酵母双杂交 88

2.14 染色质免疫沉淀 91

2.15 显微注射 95

2.16 噬菌体展示 98

第三章 基因操作 102

3.1 基因打靶 102

3.2 敲入 104

3.3 敲除 107

3.4 敲低 111

3.5 CRE重组 114

3.6 FLP重组 117

3.7 CRISPR 120

3.8 TALENs 123

3.9 锌指核酸酶 126

3.10 RNA干扰 129

3.11 DNA改组 132

3.12 基因驱动 136

3.13 转座突变 139

3.14 反向遗传学 143

第四章 检测 148

4.1 逆转录PCR 148

4.2 实时PCR 151

4.3 环介导的等温扩增 154

4.4 DNA芯片 157

4.5 蛋白质芯片 161

4.6 酶联免疫吸附试验 164

4.7 DNA指纹 168

4.8 限制片段长度多态性 171

4.9 多态性DNA随机扩增 175

4.10 扩增片段长度多态性 178

4.11 分子诊断 181

4.12 液体活检 184

4.13 无创产前检测 187

4.14 生物传感器 190

第五章 序列分析 194

5.1 桑格测序 194

5.2 鸟枪测序 198

5.3 454测序 201

5.4 Illumina测序 205

5.5 纳米孔测序 208

5.6 单细胞测序 211

5.7 宏基因组 214

5.8 RNA测序 217

5.9 染色体构象捕获 220

5.10 全基因组关联分析 223

第六章 疫苗 227

6.1 灭活疫苗 227

6.2 减毒疫苗 230

6.3 亚单位疫苗 233

6.4 载体疫苗 236

6.5 DNA疫苗 239

6.6 复制子疫苗 242

6.7 病毒样颗粒疫苗 246

6.8 治疗性疫苗 249

6.9 佐剂 251

6.10 CpG佐剂 254

6.11 植物表达疫苗 257

6.12 气溶胶疫苗 260

第七章 生物治疗 265

7.1 杂交瘤细胞 265

7.2 人源化抗体 268

7.3 抗体文库 271

7.4 抗体组库 275

7.5 双特异性抗体 278

7.6 抗体药物偶联 280

7.7 基因治疗 283

7.8 诱导性多能干细胞 286

7.9 干细胞治疗 289

7.10 过继性T细胞治疗 292

7.11 嵌合抗原受体T细胞免疫疗法 295

7.12 溶瘤病毒 298

7.13 噬菌体治疗 301

第八章 生物制药 306

8.1 大肠杆菌表达 306

8.2 酵母表达 309

8.3 昆虫杆状病毒表达 313

8.4 密码子优化 316

8.5 高通量筛选 320

8.6 组合化学 323

8.7 悬浮培养 326

8.8 生物反应器 328

8.9 鼻喷剂 331

8.10 微囊 335

8.11 芯片上的器官 338

第九章 生物工程 343

9.1 合成生物学 343

9.2 代谢工程 345

9.3 组织工程 348

9.4 体细胞核移植 351

9.5 生物打印 354

9.6 光遗传学 356

9.7 生物矿化 359

9.8 纳米生物技术 363

9.9 生物修复 366

9.10 生物降解 369

附录A 机构名称中英文对照 373

附录B 缩略词 385

附录C 诺贝尔生理学或医学奖 386

附录D 诺贝尔化学奖 392

结语 395